Human Free Prostate Specific Antigen (fPSA) ELISA Kit

سرطان ها بعد از بیماری های قلبی و عروقی به عنوان مهم ترین علل مرگ و میر در جهان مطرح اند. سرطان پروستات یکی از شایع ترین این بیماری ها است. با این حال ابتلا به این بدخیمی در سرطان های منتهی به مرگ و میر در مردان است.

سرطان پروستات در سنین کمتر از 50 سال نادر است. درمان این بیماری در مراحل اولیه یعنی زمانیکه توده سرطانی در داخل کپسول پروستات باشد دارای شانس بالایی است. لذا در سال 1986 انجمن دارو و غذای ایالت متحده امریکا (FDA) سنجش PSA سرمی را جهت غربالگری و امکان تشخیص در مراحل اولیه سرطان پروستات تصویب نمود. انجام این تست برای افراد بالای 50 سال به صورت غربالگری سالانه ضروری است.

اهمیت اندازه گیری PSA

آنتی ژن اختصاصی پروستات (PSA) یک سرین پروتئاز با فعالیتی مشابه کیموتریپسین می باشد. افزایش مقادیر PSA سرم در انواع تومورهای خوش خیم بدخیم و متاستاتیک پروستات مشاهده میشود سطح PSA سرم با افزایش حجم تومور افزایش می یابد. PSA در جریان خون به دو شکل آزاد (FPSA) و فرم متصل به پروتئین های مهارکننده پروتئاز شامل a1-آنتی کیموتریپسین و 2- ماکروگلوبولین وجود دارد که در مجموع PSA توتال (PSA) نامیده می شوند. در هایپرپلازی خوش خیم پروستات (BPH)، سطح FPSA در خون افزایش می یابد، در حالی که سرطان پروستات با افزایش فرم متصل همراه است. بنابراین درصد PSA آزاد (PSA) با سرطان پروستات ارتباط معکوس دارد. حیطه کاربرد این کیت اندازه گیری سطح Free-PSA در سرم انسان به روش الایزا می باشد.

اساس روش سنجش

این آزمایش براساس الایزای ساندویچ ترتیبی طراحی شده است. با اضافه شدن آنتی بادی بیوتینیله و سرم حاوی آنتی ژن به چاهک بی حرکت سازی کمپلکس های ایمنی توسط واکنش بین استرپتاویدین تثبیت شده در کف چاهک ها و آنتی بادی بیوتینیله ضد fPSA صورت می گیرد. پس از شستشوی چاهک ها، آنتی بادی متصل به آنزیم HRP اضافه شده و کمپلکس های ایمنی تشکیل می شوند پس از به تعادل رسیدن واکنش و شستشوی مجدد چاهک ها با افزودن محلول رنگ زا (سوبسترای آنزیم HRP) و سپس محلول متوقف کننده، محصول نهایی تولید می شود که بیشترین جذب نوری را در طول موج 450 نانومتر دارد. مقدار رنگ ایجاد شده و در نتیجه شدت جذب نوری با غلظت PSA، سرم ارتباط مستقیم دارد. در نهایت غلظت fPSA سرم به کمک منحنی استاندارد محاسبه می گردد.

محتویات کیت:

- کالیبراتورهای 0.75 میلی لیتری: شامل 6 ویال کالیبراتور با غلظت های 0، 0.5، 1، 2.5، 5 و 10 ng/mL
- محلول کونژوگه آنزیمی (fPSA Enzyme Conjugate) 11 میلی لیتری: یک ویال شامل محلول آنتی بادی نشان دار شده با آنزیم و آنتی بادی بیوتینیله شده
- محلول کونژوگه بیوتینی (fPSA Biotin Conjugate) 11 میلی لیتری: یک ویال شامل محلول آنتی بادی منوکلونال و بیوتینیله شده
- پلیت 96 تستی: یک پلیت حاوی استرپتاویدین تثبیت شده که به همراه رطوبت گیر در کیسه آلومینیومی بسته بندی شده است.
- محلول شستشو غلیظ (Wash Buffer-50X) بیست میلی لیتری: یک ویال شامل سورفاکتانت محلول شده در بافر فسفات
- محلول سوبسترای (Substrate A) A به حجم 6.5 میلی لیتر: یک ویال محلول تترا متیل بنزیدین (TMB)
- محلول سوبسترای (Substrate B) B به حجم 6.5 میلی لیتر: یک ویال محلول هیدروژن پراکساید (H2O2)
- محلول متوقف کننده (Stop Solution) به حجم 12 میلی لیتر: یک ویال حاوی محلول متوقف کننده واکنش
- سرم کنترل (fPSA Control): ویال های حاوی 5.0 میلی لیتر سرم کنترل
- برچسب مخصوص پلیت: یک ورق